使用鱼肌肽ELISA试剂盒时,需严格遵守以下注意事项以确保实验结果的准确性和可靠性:
1. 试剂预处理:在首次使用前,确保所有试剂达到室温(20-25℃),并轻微离心以聚集底部。未使用完毕的试剂应立即冷藏保存于2-8℃。
2. 温度控制:严格按照说明书指定的温度(通常为37℃)进行孵育,使用水浴箱能更好地控制温育条件。
3. 洗涤关键:洗板操作需仔细执行,避免因洗涤不彻底导致的背景噪声增加。每次洗涤后,应轻拍板边以去除孔内残留液体,但避免过度干燥。
4. 防止污染:实验全程需避免交叉污染,尤其是终止液和显色液,接触后立即清洗。操作时勿进食、饮水或使用化妆品,勿口吸液体。
5. 空白对照与标准曲线:设立空白对照孔,不添加样本或试剂,仅用于最终读数调零。确保建立标准曲线以精确量化样本中的鱼肌肽浓度。
6. 操作顺序与时间:严格遵守操作步骤的时间安排,每个步骤完成后立即进行下一步,避免超时导致结果偏差。
7. 水质要求:实验中必须使用去离子水或蒸馏水,切勿使用自来水或矿泉水,以防杂质干扰实验。
8. 设备校准:使用精确校准的加样器,特别是低体积(如<10ul)的加样操作,推荐使用高品质进口加样器。
9. 避免曝光与保存:避免底物液和显色液直接光照,已变色的底物不能使用。实验后,未用完的试剂应依据说明妥善保存。
遵循以上注意事项,能够有效提升鱼肌肽ELISA检测的准确度和重复性,为科学研究提供可靠的数据支持。