品牌：卡凯希
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试剂配制:

1、酶联板(Assay plate ):一块(96孔或者48孔)。

2、标准品(Standard):2瓶(冻干品)。

3、样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。

4、生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。

5、辣根化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-idin Diluent):1×10ml/瓶。

6、生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)

7、辣根化物酶标记亲和素(HRP-idin):1×120μl/瓶(1:100)

8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。

9、浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。

10、终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

试剂准备:

1. 使用前将所有的试剂和标本缓慢均衡至室温(18-25oC),试剂不能直接在37oC溶解。

2. 标准品(冻干品):每瓶标准品加入标准品稀释液1mL,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为2000pg/mL。准备7个稀释标准品的EP管,每个EP管中加入150μL的标准品稀释液,如图所示依次倍比稀释成不同的梯度, 标准品稀释液(0pg/mL)直接作为空白孔。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。

3. 浓洗涤液:用580mL蒸馏水或去离子水将20mL浓洗涤液稀释至600mL,进行30倍稀释。

优点:

安全性
1)避免直接接触停止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请赶快用水冲刷。
2)实验中不要吃喝、抽烟或运用化妆品。
3)不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
1.准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。
2.灵敏度：最-低检测浓度小于1.0ng儿。
3.特：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4.重复性：板内、板间变异系数均小于15%。
5.贮藏：2-8℃，避光防潮保存。
6.有效期：6个月

1. 样品收集：- 血清：全血样本应该在抗凝剂（如EDTA）中收集，然后立即离心以分离血清。通常，使用3000 g的转速离心10-15分钟。
- 尿液：收集24小时尿液样本，以确保获得准确的CTX-1水平。避免收集晨尿，因为它可能含有更高的CTX-1浓度。
2. 样品处理： - 血清：收集后，将血清转移到无菌管中，避免接触金属表面，因为金属可能会降解CTX-1。
- 尿液：对于尿液，可以使用尿液稳定剂（如防腐剂）以防止细菌生长和蛋白降解。
3. 保存：- 短期保存：样品可以在4°C下冷藏1-2天。
- 长期保存：对于长期存储，-80°C是选择。避免反复冻融，因为这可能导致样本的损失或变性。
4. 标准化：所有样本应在相同条件下收集和处理，以确保结果的可比性。
5. 样品稀释：根据ELISA试剂盒的说明，可能需要对血清或尿液样本进行适当的稀释，以确保检测范围内的浓度。
6. 记录：在收集样本时，记录样本信息，包括患者ID、收集时间、样本类型等，以便后续数据分析。
7. 操作前准备：在进行ELISA之前，确保样本已经充分解冻并混合均匀，避免形成沉淀。

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