（酶联免疫吸附测定）的基本使用方式可以概括为以下几个步骤：
1.样品准备：- 收集样本，如血液、组织、细胞培养上清液等。
- 按照试剂盒的指示处理样本，如离心、过滤、稀释或沉淀。
2. 标准曲线：- 准备标准品：按照试剂盒提供的浓度梯度稀释标准溶液。
- 在微孔板的多个孔中加载标准品，通常是双倍稀释系列。
3. 预包被： - 微孔板通常预先包被有特抗体，用于捕捉待测物质。
4. 样品加载：- 在微孔板的孔中加载样品和空白对照。
5. 封闭：- 可能需要添加封闭剂以减少非特结合。
6. 孵育：- 将微孔板在室温或37°C下孵育一段时间，让待测物质与包被抗体结合。
7. 洗涤：- 清洗微孔板以去除未结合的物质。
8. 添加酶标记的抗体：- 加入酶标记的抗体，它可以与步结合的抗原结合（在竞争法ELISA中，这可能是针对同一抗原的抗体）。
9. 再次孵育：- 让酶标记的抗体与抗原结合。
10. 洗涤：- 清洗微孔板以去除未结合的酶标记抗体。
11. 添加底物溶液：- 加入底物，底物在酶的作用下会发生颜色变化。
12. 孵育：- 允许颜色发展到稳定的程度，时间根据试剂盒说明确定。
13. 终止反应：- 加入终止液，停止颜色变化并稳定结果。
14. 读取吸光度：- 使用酶标仪在特定波长（通常450nm，有时405nm或630nm）下读取吸光度。
15. 数据分析：- 根据标准曲线计算样品中待测物质的浓度。