马组织蛋白酶L(Cath-L)elisa检测试剂盒
使用说明书
检测原理:
马组织蛋白酶L(Cath-L)elisa检测试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被微囊藻毒素LR(MC-LR)抗体的包被微孔中,依次
加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻-底洗涤。用底物TMB显色,TMB在化物酶的催化下转化成蓝
色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的微囊藻毒素LR(MC-LR)呈正相关。用酶标仪在450m波长
下测定吸光度(0D值),计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1.样本不能含叠氮钠(NaN3),因为叠氮钠(NaN3)是辣根化物酶(HRP)的剂。
2.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行。
3.植物萃取液或其它相关样本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测。
4.保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分
解冻。
自备物品:
*移液器和移液头**:用于量取液体,确保移液头与实验需求匹配。
**微量离心机**:用于样本的离心处理。
**恒温水浴或孵育器**:控制孵育温度,通常是37°C。
**洗板机**:用于清洗微孔板,减少非特结合。
**酶标仪**:测量吸光值,通常在450nm或其他波长。
**振荡器**:混合溶液,确保成分均匀。
**微量滴定管和量筒**:用于较大体积液体的转移。
**冷藏设备**:保持某些试剂在合适的低温环境中。
**实验室记事本和笔**:记录实验步骤和数据。
**防护装备**:实验服、手套、护目镜等,保护实验者安全。
**标准曲线绘制工具**:如Excel或其他数据分析软件,用于处理数据和绘制标准曲线。
**样本处理设备**:如离心机、匀浆器(视样本类型而定)。
**计时器**:确保每个步骤的时间准确。
在开始实验前,确保所有设备已校准,试剂新鲜且在有效期内,同时遵循实验室的安全规程。如果实验涉及生物样本,还需遵守生物安全规定
操作注意事项:
1.从室温平衡20mi后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4°℃。
2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3.样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1mi,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6.每子孔加入底物A、B各50μL,37°C避光孵育15min。
7.每子孔加入终止液50uL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
除标准品外4℃保存6个月内有效标准品4°℃保存,1-2周内有效,-20°℃保存11个月内有效由于标准品一般是冻干粉,在制备后需要严格校准,
试剂的准备:
20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
洗板方法:
1.手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1mi后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。
2.自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
操作步紧:
1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3.样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加人辣根化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴
锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1in,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50uL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的0D值。
结果判断
绘制标准曲线:在Ec工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应0D值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算
各样本浓度值。
试剂盒性能:
安全性
1)避免直接接触停止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请赶快用水冲刷。
2)实验中不要吃喝、抽烟或运用化妆品。
3)不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
1.准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
2.灵敏度:最-低检测浓度小于1.0ng儿。
3.特:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4.重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
5.贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
6.有效期:6个月
**免责声明**
本ELISA试剂盒仅供科学研究使用,不适用于临床诊断或决策。用户在使用本产品时应具备相关的实验技能和知识,。在开始实验前,请仔细阅读并理解产品说明书和此免责声明。
相关产品推荐:
KKX-58150M 小鼠CD47抗体(CD47-Ab)elisa试剂盒 Mouse CD47-Ab elisa kit CD47-Ab
KKX-58309M 小鼠CD45分子(CD45)elisa试剂盒 Mouse Cluster of differentiation 45 elisa kit CD45
KKX-56841M 小鼠巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)elisa试剂盒 Mouse Macrophage Colony-Stimulating Factor elisa kit M-CSF
KKX-58045M 小鼠黄素单氧化酶3(FMO3)elisa试剂盒 Mouse flin-containing monooxygenase 3 elisa kit FMO3
KKX-46187Z 植物1.6二磷酸果糖酸酶(FDPase)elisa试剂盒 Plant 1,6 Fructose Diphosphate elisa Kit
KKX-56451M 小鼠B细胞-XL(Bcl-xl)elisa试剂盒 Mouse Bcl-xl elisa kit Bcl-xl
KKX-46720Z 植物扩展蛋白(EXPANSIN)elisa试剂盒 Plant Expansin elisa Kit
KKX-58942M 小鼠增殖细胞核抗原(PCNA)elisa试剂盒 Mouse Proliferating cell nuclear antigen elisa kit PCNA
KKX-59257M 小鼠抗大豆蛋白IgG1抗体(Anti-soy protein-IgG1)elisa试剂盒 Mouse Anti-soy protein-IgG1 anitbody elisa kit Anti-soy protein-IgG1
KKX-46331Z 植物腐胺N-转移酶(PMT)elisa试剂盒 Plant PMT elisa Kit
KKX-45927Z 植物磺基转移酶 1A1(SULT 1A1)elisa试剂盒 Plant Sulfotransferase 1A1 elisa Kit
KKX-58401M 小鼠趋化因子C-C-基元配体1a(CCL1a)elisa试剂盒 Mouse Chemokine C-C-Motif Ligand 1a elisa kit CCL1a
KKX-59171M 小鼠雌受体相关受体α(ERRα)elisa试剂盒 Mouse Estrogen Related Receptor a elisa kit ERRα
KKX-58840M 小鼠热休克蛋白-90β1(HSP-90β1)elisa试剂盒 Mouse Heat Shock Protein 90β1 elisa kit HSP-90β1
KKX-58674M 小鼠溶酶体a-甘露糖苷酶-II(MAN2B1)elisa试剂盒 Mouse Lysosomal alpha-mannosidase elisa kit MAN2B1
KKX-56554M 小鼠β位淀粉样前体蛋白裂解酶1(BACE1)elisa试剂盒 Mouse β-site APP-Cleing Enzyme 1 elisa kit BACE1
KKX-59514M 小鼠肝细胞核因子1α(HNF1a)elisa试剂盒 Mouse Hepatocyte Nuclear Factor 1 Alpha elisa kit HNF1a
KKX-45691Z 植物脂肪酸去饱和酶(FADS)elisa试剂盒 Plant fatty acid desaturases elisa Kit
KKX-46060Z 植物海藻糖酶(trehalase)elisa试剂盒 Plant trehalase elisa Kit
KKX-46494Z 植物末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)elisa试剂盒 Plant terminal deoxynucleotidyl transferase elisa Kit