牛甘氨酸(Gly)elisa检测试剂盒
使用说明书
检测原理:
牛甘氨酸(Gly)elisa检测试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被微囊藻毒素LR(MC-LR)抗体的包被微孔中,依次
加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻-底洗涤。用底物TMB显色,TMB在化物酶的催化下转化成蓝
色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的微囊藻毒素LR(MC-LR)呈正相关。用酶标仪在450m波长
下测定吸光度(0D值),计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1.样本不能含叠氮钠(NaN3),因为叠氮钠(NaN3)是辣根化物酶(HRP)的剂。
2.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行。
3.植物萃取液或其它相关样本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测。
4.保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分
解冻。
自备物品:
1.酶标仪(450nm)
2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒温箱
操作注意事项:
1. 样品准备:收集血液样本,离心分离血清或血浆,并按照试剂盒的说明进行适当的稀释或处理。
2. 标准曲线建立:使用试剂盒提供的标准品,按照的浓度梯度进行稀释,以建立吸光度与浓度的关系曲线。
3. 预处理:可能需要对样品进行预处理,例如去除蛋白质或去除其他可能干扰检测的成分。
4. 样品和标准品加载:将样品和标准品加载到预包被有抗体的微孔板中。
5. 孵育:在一定温度和时间下让样本和抗体结合。
6. 洗涤:使用洗板机或手动清洗微孔板,去除未结合的物质。
7. 添加酶标记的抗体:加入标记了酶的抗体,使其与步结合的抗原结合。
8. 再次孵育:允许酶标记的抗体与抗原结合。
9. 洗涤:再次清洗微孔板以去除未结合的酶标记抗体。
10. 添加底物溶液:加入底物,底物在酶的作用下会发生颜色变化。
11. 孵育:让反应进行到一定时间,颜色变化达到稳定。
12. 终止反应:加入终止液,停止颜色变化。
13. 读取吸光度:使用酶标仪或微孔板读取器在波长下测量每个孔的吸光度。
14. 数据分析:根据标准曲线计算ucOC的浓度。
试剂的准备:
20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
洗板方法:
1.手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1mi后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。
2.自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
操作步紧:
1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3.样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加人辣根化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴
锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1in,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50uL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的0D值。
结果判断
绘制标准曲线:在Ec工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应0D值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算
各样本浓度值。
试剂盒性能:
安全性
1)避免直接接触停止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请赶快用水冲刷。
2)实验中不要吃喝、抽烟或运用化妆品。
3)不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
1.准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
2.灵敏度:最-低检测浓度小于1.0ng儿。
3.特:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4.重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
5.贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
6.有效期:6个月
**免责声明**
本ELISA试剂盒仅供科学研究使用,不适用于临床诊断或决策。用户在使用本产品时应具备相关的实验技能和知识,。在开始实验前,请仔细阅读并理解产品说明书和此免责声明。
相关产品推荐:
KKX-46880Z 植物ABA醛氧化酶(AAO)elisa试剂盒 Plant Abscisic aldehyde oxidase elisa Kit
KKX-57441M 小鼠N--D-天门冬氨酸(NMDA)受体A亚单位NR2(NR2A)elisa试剂盒 Mouse N-Methyl-D-Aspartate (NMDA) Receptor 2A elisa kit NR2A
KKX-58934M 小鼠肌球蛋白Va(Myosin-Va)elisa试剂盒 Mouse Myosin-Va elisa kit Myosin-Va
KKX-56851M 小鼠抗单链DNA抗体;变性DNA抗体(ssDNA)elisa试剂盒 Mouse single stranded DNA Antibody elisa kit ssDNA
KKX-58531M 小鼠活跃脑源性神经营养因子(ActiveBDNF)elisa试剂盒 Mouse ActiveBrain-derived neurotrophic factor elisa kit ActiveBDNF
KKX-46903Z 植物氨苄青霉素(AMP)elisa试剂盒 Plant AMP elisa Kit
KKX-58160M 小鼠二酰甘油激酶(DGK)elisa试剂盒 Mouse Diacylglycerol Kinase elisa kit DGK
KKX-58751M 小鼠胃蛋白酶I(PepsinI)elisa试剂盒 Mouse Pepsin I elisa kit PepsinI
KKX-57425M 小鼠钙离子ATP酶(Ca-ATPase)elisa试剂盒 Mouse Ca-ATPase elisa kit Ca-ATPase
KKX-57783M 小鼠张力蛋白3(TNS3)elisa试剂盒 Mouse Tensin-3 elisa kit TNS3
KKX-59049M 小鼠α-甘露糖苷酶(αManase)elisa试剂盒 Mouse αmannosidase elisa kit αManase
KKX-57023M 小鼠肾上腺素(EPI)elisa试剂盒 Mouse Epinephrine;Adrenaline elisa kit EPI
KKX-58555M 小鼠去化酶Sirtuin-6(SIRT6)elisa试剂盒 Mouse NAD-dependent deacetylase sirtuin-6 elisa kit SIRT6
KKX-46905Z 植物莽草酸奎宁酸肉桂酰转移酶(HCT)elisa试剂盒 Plant HCT elisa Kit
KKX-46567Z 植物叶绿素代谢产物还原酶(CCR)elisa试剂盒 Plant chlorophyll catabolite reductase elisa Kit
KKX-46022Z 植物还原型谷胱甘肽酶(GSH)elisa试剂盒 Plant Reduced glutataione enzym elisa Kit
KKX-56821M 小鼠碱性磷酸酶(ALP)elisa试剂盒 Mouse alkaline phosphatase elisa kit ALP
KKX-57452M 小鼠白蛋白片段257-264(OVA257-264)elisa试剂盒 Mouse OVA257-264 elisa kit OVA257-264
KKX-45591Z 植物烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)elisa试剂盒 Plant nicotinamide adenine dinucleotide phosphate elisa Kit
KKX-58911M 小鼠精胺合成酶(SRM)elisa试剂盒 Mouse spermidine synthase elisa kit SRM