产地 | 上海 |
保存条件 | 2-8℃ |
品牌 | 卡凯希 |
货号 | KKX-l7L0201 |
用途 | 科研实验 |
检测方法 | 酶联免疫法 |
保质期 | 6个月 |
适应物种 | 人,大鼠,小鼠,植物,昆虫微生物等 |
检测限 | 详见说明书 |
数量 | 246 |
包装规格 | 96T/48T |
标记物 | HRP标记物 |
样本 | 血清,血浆细胞,组织,等相关液体 |
应用 | 详见说明书 |
是否进口 | 否 |
产品名称 |
牛钙蛋白酶(Calpain)elisa检测试剂盒 |
英文名称 |
Calpain |
货号 |
KKX-l7L0201 |
品牌:卡凯希
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试剂配制:
1、酶联板(Assay plate ):一块(96孔或者48孔)。
2、标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3、样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-idin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根化物酶标记亲和素(HRP-idin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
试剂准备:
1. 牛钙蛋白酶(Calpain)elisa检测试剂盒使用前将所有的试剂和标本缓慢均衡至室温(18-25oC),试剂不能直接在37oC溶解。
2. 标准品(冻干品):每瓶标准品加入标准品稀释液1mL,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为2000pg/mL。准备7个稀释标准品的EP管,每个EP管中加入150μL的标准品稀释液,如图所示依次倍比稀释成不同的梯度, 标准品稀释液(0pg/mL)直接作为空白孔。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
3. 浓洗涤液:用580mL蒸馏水或去离子水将20mL浓洗涤液稀释至600mL,进行30倍稀释。
优点:
安全性
1)避免直接接触停止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请赶快用水冲刷。
2)实验中不要吃喝、抽烟或运用化妆品。
3)不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
1.准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
2.灵敏度:最-低检测浓度小于1.0ng儿。
3.特:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4.重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
5.贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
6.有效期:6个月
1标准品的加样:设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50L;。
2加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液4
0,然后再加待测样品10μ(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.加酶:每孔加入酶标试剂100μ,空白孔除外。
4.温育:用封板膜封板后置37℃温育60分钟。
5.配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。
6洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复次拍干。
7.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37C避光显色15分钟.
8.终止:每孔加终止液50μ,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
9.测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。
牛钙蛋白酶(Calpain)elisa检测试剂盒服务承诺:
一、产品质量保证,有问题免费包换;
二、提供免费代测服务(为客户提供来样检测服务,限度实验结果的有效性);
三、提供全程技术指导。
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