试剂配制:

1、酶联板(Assay plate ):一块(96孔或者48孔)。

2、标准品(Standard):2瓶(冻干品)。

3、样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。

4、生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。

5、辣根化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-idin Diluent):1×10ml/瓶。

6、生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)

7、辣根化物酶标记亲和素(HRP-idin):1×120μl/瓶(1:100)

8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。

9、浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。

10、终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

试剂准备:

1. 豚鼠TNF酮素F-α(TNF-α)试剂盒使用前将所有的试剂和标本缓慢均衡至室温(18-25oC),试剂不能直接在37oC溶解。

2. 标准品(冻干品):每瓶标准品加入标准品稀释液1mL,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为2000pg/mL。准备7个稀释标准品的EP管,每个EP管中加入150μL的标准品稀释液,如图所示依次倍比稀释成不同的梯度, 标准品稀释液(0pg/mL)直接作为空白孔。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。

3. 浓洗涤液:用580mL蒸馏水或去离子水将20mL浓洗涤液稀释至600mL,进行30倍稀释。

优点:

安全性
1)避免直接接触停止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请赶快用水冲刷。
2)实验中不要吃喝、抽烟或运用化妆品。
3)不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
1.准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。
2.灵敏度：最-低检测浓度小于1.0ng儿。
3.特：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4.重复性：板内、板间变异系数均小于15%。
5.贮藏：2-8℃，避光防潮保存。
6.有效期：6个月

1. 样品收集：- 血液样本：全血样本通常使用EDTA抗凝剂收集，避免使用肝素，因为肝素可能干扰PTS的测定。然后立即离心以分离血清或血浆。使用3000 g的转速离心10-15分钟。
- 细胞或组织样本：可以收集组织样本进行细胞抽提，提取蛋白质，然后进行PTS的测定。
2. 样品处理：- 血清/血浆：将分离的血清或血浆转移至无菌管中，避免光照和高温，因为这些因素可能影响PTS的活性或稳定性。
- 组织/细胞样本：使用适当的裂解缓冲液裂解细胞或组织，然后离心去除不溶性成分。
3. 保存：- 短期保存：样品可以在4°C冷藏，但尽快进行分析。
- 长期保存：-80°C冷冻可以长期保存样本。避免反复冻融以减少样本损失。
4. **标准化**：确保所有样本在相同条件下收集和处理，以提高结果的可比性。
5. **样品稀释**：根据ELISA试剂盒的说明，可能需要对样本进行适当的稀释，以使PTS的浓度在检测范围内。

豚鼠TNF酮素F-α(TNF-α)试剂盒服务承诺：

一、产品质量保证,有问题免费包换；

二、提供免费代测服务(为客户提供来样检测服务,限度实验结果的有效性)；

三、提供全程技术指导。

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